期刊简介
本刊是中国科学技术协会主管、中国病理生理学会主办、暨南大学承办的国家级综合性病理生理学高级学术刊物。杂志刊登有关病理生理学理论研究（包括实验研究和临床研究）方面的论著、专题综述、教学研究、科研仪器和药品评价介绍等，注重介绍疾病发病机制和临床病理生理学研究。适合医药院校教学科研人员、研究生、临床医务工作者和高年级医学生阅读。
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首页>中国病理生理杂志
- 杂志名称：中国病理生理杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中国病理生理学会
- 国际刊号：1000-4718
- 国内刊号：44-1187/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2008和2011年分别被评为第一届和第二届中国精品科技期刊；2008～2011年连续4次荣获“百种中国杰出学术期刊”奖；2011年被评为RCCSE（武汉大学中国科学评价研究中心）中国权威期刊；2010年荣获广东省期刊评选最高奖——品牌期刊奖；2011年荣获广东省优秀科技期刊一等奖。期刊收录：万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
小鼠心肌微血管内皮细胞的原代培养及生物学特性
辛毅；许秀芳；黄益民；张颖；李温斌；李娜
关键词：心肌微血管内皮细胞, 原代细胞培养, 生物学特性, 小鼠
摘要：目的:探讨一种高效、稳定的从小鼠心肌组织中分离培养心肌微血管内皮细胞的方法并观察细胞的生物学特性.方法:以多聚赖氨酸对培养皿作预包被,采用Ⅱ型胶原酶消化、差速贴壁分离法,结合内皮细胞专用培养基,分离培养微血管内皮细胞并进行扩增.利用倒置显微镜观察细胞生长情况；台盼蓝法、绘制生长曲线和MTT法分别测定心肌微血管内皮细胞传代成活率、不同代生长及增殖特征；以DiI-ac-LDL和FITC-UEA-1荧光双标,结合CD31、vWF和CD34免疫荧光鉴定细胞表面特异性抗原；体外血管形成实验检测心肌微血管内皮细胞的功能.结果:酶消化、差速贴壁法分离培养2d后,细胞呈散在的、小簇状聚集性生长,4～5d迅速生长呈单层排列,细胞为梭形、三角形或多角形,7~8d后呈铺路石样即可传代；传代细胞经台盼蓝法检测成活率均为95％以上；第1、3代细胞生长曲线近似“S”形,MTT法显示第1、3代细胞在第2～4d吸光度变化较明显(P＜0.05)；随传代次数的增加,第5代细胞生长曲线近似平缓,吸光度无明显变化,细胞逐渐衰老；DiI-ac-LDL和FITC-UEA-1荧光双标阳性率为(89.2士3.5)％,相关特异性抗原CD31、vWF和CD34免疫荧光鉴定阳性率为(56.7±3.7)％、(78.5±2.6)％和(67.8±4.2)％；体外血管形成实验显示,6～12 h后出现明显的管腔结构.结论:以多聚赖氨酸作预包被,采用Ⅱ型胶原酶消化、差速贴壁法并结合内皮细胞专用培养基,可获得纯度较高的小鼠心肌微血管内皮细胞,为心脏疾病的研究提供种子细胞.
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