期刊简介
本刊是中国科学技术协会主管、中国病理生理学会主办、暨南大学承办的国家级综合性病理生理学高级学术刊物。杂志刊登有关病理生理学理论研究（包括实验研究和临床研究）方面的论著、专题综述、教学研究、科研仪器和药品评价介绍等，注重介绍疾病发病机制和临床病理生理学研究。适合医药院校教学科研人员、研究生、临床医务工作者和高年级医学生阅读。
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首页>中国病理生理杂志
- 杂志名称：中国病理生理杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中国病理生理学会
- 国际刊号：1000-4718
- 国内刊号：44-1187/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2008和2011年分别被评为第一届和第二届中国精品科技期刊；2008～2011年连续4次荣获“百种中国杰出学术期刊”奖；2011年被评为RCCSE（武汉大学中国科学评价研究中心）中国权威期刊；2010年荣获广东省期刊评选最高奖——品牌期刊奖；2011年荣获广东省优秀科技期刊一等奖。期刊收录：万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
大鼠心肌素慢病毒RNA干扰载体的构建及其对血管平滑肌细胞分化的影响
揭伟；申志华；王晓燕；况东；王国平；敖启林
关键词：心肌素, 载体构建, 慢病毒, 血管平滑肌细胞, 细胞分化
摘要：目的:构建大鼠心肌素(myocardin)慢病毒RNA干扰(RNAi)重组质粒,分析该RNAi质粒的干扰效果及其对血管平滑肌细胞(VSMCs)分化的影响.方法:设计并合成3对针对大鼠myocardin的shRNA片段,退火后将双链oligo-DNA克隆入慢病毒质粒载体pGCSIL- GFP获得重组干扰质粒pGCSIL- GFP - shMyocd.以pEGFP - N1 / X124G表达载体构建含Flag标签的myocardin表达质粒pEGFP - N1- Myocd.将重组干扰质粒和过表达质粒共转染293T细胞,Western blotting分析Flag标签蛋白的表达,筛选出干扰效率好的干扰质粒并大量扩增.干扰质粒转染大鼠主动脉VSMCs,RT - PCR和Western blotting检测myocardin及分化标志物SM22α的表达.结果:成功构建大鼠myocardin的慢病毒干扰质粒pGCSIL- GFP - shMyocd和过表达质粒pEGFP - N1 - Myocd.上述2种质粒共转染293T细胞后,1号干扰质粒转染组Flag标签蛋白表达下降显著.将1号质粒进行大包装,获得滴度为1×1012 TU/L的慢病毒颗粒,该病毒转染VSMCs后,myocardin表达明显下调并伴随分化标志物SM22α表达的显著下降.结论:成功构建大鼠myocardin慢病毒重组干扰质粒pGCSIL- GFP - shMyocd;抑制基因myocardin表达后伴随VSMCs分化的表达下降,提示myocardin在VSMCs分化过程中的重要性.pGCSIL- GFP - shMyocd重组质粒的成功构建为后续研究特定病理条件下(如动脉粥样硬化)VSMCs表型转变的分子机制奠定了基础.
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