期刊简介
本刊是中国科学技术协会主管、中国病理生理学会主办、暨南大学承办的国家级综合性病理生理学高级学术刊物。杂志刊登有关病理生理学理论研究（包括实验研究和临床研究）方面的论著、专题综述、教学研究、科研仪器和药品评价介绍等，注重介绍疾病发病机制和临床病理生理学研究。适合医药院校教学科研人员、研究生、临床医务工作者和高年级医学生阅读。
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首页>中国病理生理杂志
- 杂志名称：中国病理生理杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中国病理生理学会
- 国际刊号：1000-4718
- 国内刊号：44-1187/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2008和2011年分别被评为第一届和第二届中国精品科技期刊；2008～2011年连续4次荣获“百种中国杰出学术期刊”奖；2011年被评为RCCSE（武汉大学中国科学评价研究中心）中国权威期刊；2010年荣获广东省期刊评选最高奖——品牌期刊奖；2011年荣获广东省优秀科技期刊一等奖。期刊收录：万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
巨噬细胞移动抑制因子基因的克隆和原核表达
单志新；余细勇；林秋雄；杨敏；符永恒；谭虹虹；郑猛；林曙光
关键词：巨噬细胞游走抑制因子, 克隆, 分子, 基因表达
摘要：目的:扩增、克隆人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因,并在大肠杆菌中表达出具有生物活性的重组MIF蛋白.方法:根据人MIF基因序列,设计、合成PCR引物,利用RT-PCR技术从人T淋巴细胞mRNA中扩增MIF基因.将MIF定向插入原核表达载体pGEX-4T-1,并将构建正确的重组表达载体pGEX-4T-MIF转化工程菌BL21(DE3),用异丙基硫代-β-D-半乳糖(IPTG)诱导表达重组MIF蛋白.用GSTrap亲合柱纯化表达产物GST-MIF,行柱上凝血酶消化,洗脱获得MIF蛋白.用巨噬细胞移动抑制试验(MMI)鉴定MIF蛋白的生物活性.结果:限制性内切酶分析和DNA测序结果表明,成功构建了重组质粒pGEX-4T-MIF,人MIF cDNA长348 bp,编码115个氨基酸.经IPTG诱导,高效表达出可溶的GST-MIF蛋白.SDS-PAGE和Western blotting分析显示,GST-MIF经凝血酶消化,获得13 kU的MIF蛋白.MIF蛋白对巨噬细胞移动的抑制率达30%,具有生物活性.结论:克隆、测定了人MIF基因,在大肠杆菌表达出具有生物活性的MIF蛋白.
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