期刊简介
本刊是中国科学技术协会主管、中国病理生理学会主办、暨南大学承办的国家级综合性病理生理学高级学术刊物。杂志刊登有关病理生理学理论研究（包括实验研究和临床研究）方面的论著、专题综述、教学研究、科研仪器和药品评价介绍等，注重介绍疾病发病机制和临床病理生理学研究。适合医药院校教学科研人员、研究生、临床医务工作者和高年级医学生阅读。
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首页>中国病理生理杂志
- 杂志名称：中国病理生理杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中国病理生理学会
- 国际刊号：1000-4718
- 国内刊号：44-1187/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2008和2011年分别被评为第一届和第二届中国精品科技期刊；2008～2011年连续4次荣获“百种中国杰出学术期刊”奖；2011年被评为RCCSE（武汉大学中国科学评价研究中心）中国权威期刊；2010年荣获广东省期刊评选最高奖——品牌期刊奖；2011年荣获广东省优秀科技期刊一等奖。期刊收录：万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏
TNFα对血管内皮细胞PDGF-B链基因转录的影响
李健；沈传陆；王小明；郭恒怡；吴其夏
关键词：血管内皮细胞, 基因转录, 荧光素酶, 上游序列, 转染细胞, 对照组, 动脉粥样硬化, 诱导反应, 炎症过程, 基因表达, 平滑肌细胞增殖, 调控的分子机制, 质粒, 限制性内切酶, 细胞株, 顺式调控元件, 方法, 表达量, 细胞裂解物, 炎症介质
摘要：TNFα主要由巨噬细胞、T细胞和NK细胞产生,是一种在急、慢性炎症过程中均有重要作用的炎症介质.动脉粥样硬化(AS)是以动脉壁内皮结构、功能损害和平滑肌细胞增殖变化为主的慢性炎症过程.AS时TNFα合成增多,且与AS的严重程度成正比.PDGF是以二聚体(AA,BB和AB)形式存在的促分裂剂.其中,PDGF-B链由PDGF-B链基因编码,该基因mRNA在AS血管内皮细胞中表达明显增高.因此,研究在TNFα作用下,血管内皮细胞PDGF-B链基因表达调控的分子机制对于阐明动脉粥样硬化的发病机制具有重要意义.目的:本实验旨在确定人PDGF-B链基因上TNFα诱导反应元件的位置.方法:用限制性内切酶和PCR等方法对PDGF-B链基因5'上游序列进行定向删切,构建了一系列含人PDGF-B链基因不同上游序列的荧光素酶报告基因质粒.以培养的HUVEC和EVC304内皮细胞株为材料,用LipofectaminTM法转染细胞.将构建的质粒pSIS-1758/+43 Luc、pSIS-189/+43 Luc和pSIS-84/+43 Luc分别与内对照质粒pSV-β-Gal共转染培养的内皮细胞,用200 U/mL TNFα分别处理转染内皮细胞18 h,收集细胞裂解物,检测荧光素酶和β-半乳糖苷酶活性,计算荧光素酶的比活性.结果:在PDGF-B链基因上游序列-1758/+43 bp和-189/+43 bp存在下,TNFα可使转染HUVEC荧光素酶表达量较对照组明显增加,前者对照组为3.43±0.01,TNFα组5.41±0.24,P>0.05 vs control;后者对照组为4.30±0.01,TNFα组7.15±0.88,P>0.01, vs control.而在PDGF-B链基因上游序列-84/+43 bp存在时,转染HUVEC荧光素酶表达量显著降低,对照组1.72±0.55,TNFα组1.90±0.69.两组无明显差异.同种方法转染EVC304内皮细胞株,结果一致.结论:TNFα促进内皮细胞PDGF-B链基因表达依赖该基因上游序列-189/+43 bp的存在,即在-189/+43 bp范围内可能存在TNFα诱导反应的顺式调控元件.
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